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新浪彩票,新浪彩票网Bio-techne|重组蛋白品名中的 CF,你究竟是个啥?

在浏览 Bio-Techne 网站的重组蛋白产品时,大家常常会对品名中的「CF」产生疑惑。CF 代表什么含义?品名中含/不含 CF 的蛋白有什么区别?哪种产品更适用于我的实验?本文一一来解惑。

 

1. CF 其名,其意 

CF,是 Carrier Free 的意思。一般来说,为了对重组蛋白的结构及活性进行保护,我们会在蛋白产品中添加牛血清白蛋白(BSA)作为载体蛋白。但考虑到 BSA 会对某些实验造成影响,我们又研发出不含载体蛋白(BSA)的产品,即 Carrier Free 蛋白。

注:并不是所有不标注 CF 的蛋白产品都含有 BSA,产品的具体成分需要参考产品说明书或 COA。

 

2. CF 蛋白与普通蛋白产品的区别

是否添加 BSA 是 CF 蛋白产品与普通蛋白产品最大的区别。这一区别使得冻干粉重溶溶液的选择以及重组蛋白的用途有所差异。

 

在蛋白冻干粉重溶时,CF 蛋白产品只要使用说明书推荐的溶液溶解到规定的浓度即可,而普通蛋白产品为了保证产品不会吸附到管壁上,为蛋白产品的重溶提供一个良好的环境,在溶液中还要额外添加 0.1% 的 BSA。

新浪彩票,新浪彩票网所需添加的 BSA 要求很高:不能含有蛋白酶,并且是 Fraction V 纯度的 BSA。R&D Systems® 提供各类含 BSA 的蛋白重溶溶液,如:RB02(BSA / PBS)和RB04(BSA/HCl),可以根据蛋白的重溶要求自行选择。

在用途上,一般情况下,我们建议使用含有 BSA 的重组蛋白用于细胞或组织培养,或作为 ELISA 标准品。相对而言,当 BSA 可能会干扰实验时,比如体内实验、蛋白标记等,则推荐使用 CF 蛋白。另外,如果实验平台有特殊要求,也应根据要求选择不含 BSA 的蛋白。

举例产品:Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein, CF(货号 7270-IL/CF)/ Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein(货号 7270-IL)

 

3. CF 蛋白维持高活性的秘诀

对比 CF 蛋白和普通蛋白,无论蛋白是否添加 BSA,它们的生物学活性实验结果、运输条件、保存条件及效期都没有区别。既然没有 BSA 作为蛋白载体,是什么让 CF 蛋白保持良好的稳定性和生物学活性呢?

举例产品:Recombinant Human TNF-alpha (HEK293-expressed) Protein, CF

 

答案就在说明书 Formulation 那一栏里,我们在蛋白中添加了海藻糖。海藻糖是一种以两个葡萄糖分子通过 α,α,1,1-糖苷键连接的二糖。海藻糖是一种非还原糖,不与氨基酸或蛋白质发生反应。

新浪彩票,新浪彩票网它本身不存在于哺乳动物体内,但哺乳动物体内却广泛存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作为一种小分子的半抗原,哺乳动物对其免疫反应性很低。这使得海藻糖对活体实验或异种移植等实验的干扰极小。

海藻糖不仅可以防止蛋白在脱水状态下改变其结构,更能在高温、低温、高渗透压的条件下保留蛋白的生物学活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保护性能与相对低廉的价格渐渐代替 BSA,成为免疫实验产品和蛋白类产品添加剂的新宠。

 

以上文字和图片来源于Bio-techne

 

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